Препарат №23. Непрямое деление. Сперматогонии в семеннике рака (рис. 22)
Для изучения непрямого деления клеток животного организма можно использовать различные объекты. В частности, в семеннике рака при делении сперматогониев можно наблюдать хорошо различимое и ярко окрашивающееся веретено деления.
Для приготовления препарата вскрывают самца речного рака. Самец отличается от самки тем, что у него первая и вторая пары брюшных ножек превращены в копулятивные органы. Первая пара имеет вид скрученной в трубочку пластинки, вторая пара образует двуветвистую конечность.
Со спинной стороны срезают панцирь и обнажают семенник. Семенник представляет собой непарную железу белого цвета, которая лежит в грудной области под сердцем, над кишкой. От семенника отходят белые же, сильно извитые трубочки - семепроводы.
Кусочек семенника фиксируют в смеси Ценкера, заливают в парафин, делают срезы толщиной 3-4 μ, и окрашивают железным гематоксилином. Материал для фиксации рекомендуется брать в мае-июне месяце, так как сперматогенез у рака протекает именно в эти месяцы и следовательно в семеннике можно наблюдать наибольшее количество делящихся клеток.
38
На препарате семенные канальцы перерезаны в различных направлениях и поэтому имеют вид кругов, овалов, тяжей и т. д. Каждый семенной каналец окружен соединительнотканной оболочкой и выстлан крупными клетками, находящимися на разных стадиях деления. При малом увеличении следует найти поперечно срезанный каналец, а при большом увеличении рассмотреть все стадии мототического деления.
Рис. 22. Митоз. Клетки семенника речного рака. I - неделящаяся клетка; II - профаза; III - метафаза; IV - анафаза; V-телофаза; VI - разделившаяся клетка (увеличение - ок. 10, об. 40):
1 - хроматин, 2-хромосомы, 3-центриоли, 4-веретено
До начала деления в клетке имеется большое круглое ядро с небольшим ядрышком и мелкими зернами хроматина. На первой фазе деления (профазе) зерна хроматина увеличиваются, их становится больше и они заполняют все ядро. На ранних стадиях профазы имеется ядерная оболочка и ядрышко; на поздних стадиях они растворяются. Надо отметить, что ядрышко растворяется раньше оболочки ядра.
В следующей фазе - метафазе - образуется веретено. Оно состоит из тонких черных (на препарате) нитей, которые сходятся на полюсах клетки. В месте схождения нитей лежат круглые
39
черные зернышки - центриоли, или клеточный центр. На этой стадии из зерен хроматина образуются хромосомы, имеющие в клетках семенника рака форму очень коротких палочек. Хромосомы на стадии метафазы концентрируются на экваторе веретена, образуя широкую экваториальную пластинку.
Следующая стадия - анафаза - характеризуется удвоением числа хромосом и расхождением их к полюсам клетки. На срезе можно найти как раннюю, так и позднюю анафазы, которые различаются по расстоянию хромосом от экватора. В поздней анафазе появляется перетяжка, в дальнейшем разделяющая клетку на две части. В последней стадии деления - телофазе - изменяется форма веретена. В центре клетки нити веретена сближаются, слипаются, постепенно бледнеют и, наконец, исчезают. Иногда при этом на экваторе остается темное круглое тельце - остатки слипшегося веретена, не успевшие раствориться. Оно называется остаточным тельцем. Хромосомы теряют свои очертания, распадаются, и образуется два новых ядра. Клетка при этом делится на две.
40