Препарат № 9. Структура ядер в темном поле. Яйцеклетка паука. Макронуклеус парамеций (рис. 9)
Представление об агрегатном состоянии ядра дает изучение ядер в темном поле (в ультрамикроскопе) при помощи параболоид-конденсора. Последний сконструирован таким образом, что центральный пучок лучей, используемый при обычном микроскопировании, задерживается при помощи металлического кружка и не попадает в объектив. Боковые лучи на границе покровного стекла и воздуха подвергаются полному внутреннему отражению и также не попадают в объектив микроскопа. Так обстоит дело, если имеется жидкая гомогенная среда. Если же в поле зрения находятся плотные образования, то они рассеивают падающий на них свет (боковые лучи), который и попадает в глаз наблюдателя. Такие образования становятся ярко светящимися на темном фоне.
В качестве объекта исследования можно взять ядра различных яйцеклеток (например, яйцеклетки паука-сенокосца или таракана), а также ядро (макронуклеус) парамеции.
Яйцеклетка паука (или таракана). Выделяют яйцеклетки по способу, описанному выше (см. препарат № 8). Помещают их в каплю воды на предметное стекло и накрывают покровным. Рассматривают в темном поле при малом и большом увеличениях.
18
Яйцеклетки имеют ярко светящуюся цитоплазму. Хорошо заметно, что в цитоплазме, плотно примыкая друг к другу, лежат крупные светящиеся зерна желтка, заполняющие всю клетку. На фоне светлой цитоплазмы заметно круглое темное ядро, в котором нельзя рассмотреть никаких светящихся структур - оно оптически пустое.
Нужно иметь в виду, что когда клетка начинает погибать (вследствие того что она выделена из организма и помещена в
Рис. 9. Живые парамеции (Paramaecium aurelia) в темном поле. Микрофотография
сравнительно неблагоприятные условия), в ядре образуется много мелких плотных белковых зернышек, в результате чего наблюдается молочно-белое свечение ядра. В дальнейшем могут образоваться большие плотные глыбки, нити и т. д. Появление свечения в ядре указывает на начало гибели клетки. Поэтому для получения оптически пустого ядра надо быстро приготовлять препарат и сразу же его рассматривать. Ядро окружено тонкой ярко светящейся оболочкой; кроме того, светится ядрышко, которое состоит из кучки мелких светящихся зерен.
Макронуклеус парамеций. Каплю жидкости из культуры парамеций (Paramaecium aurelia) помещают на предметное стекло и накрывают покровным. Рассматривают сначала под малым, а затем под большим увеличением микроскопа в темном поле.
В цитоплазме парамеции видны ярко светящиеся зерна; это - пищеварительные вакуоли и различные включения. Можно заметить черные круглые образования, которые то появляются, то исчезают; это - пульсирующие вакуоли. Макронуклеус
19
парамеции овальный и в ультрамикроскопе совершенно темный. На фоне темного ядра иногда лежат светящиеся зернышки цитоплазмы, находящейся выше или ниже ядра. Можно посмотреть также ядра Paramaecium caudatum, отличающиеся тем, что в темном поле они имеют молочно-белый цвет.
Наблюдения ядер в темном поле дают понятие о субмикроскопическом строении ядер, о сравнительной плотности их структур. Ядра яйцеклеток и макронуклеус Paramaecium aurelia имеют жидкую консистенцию. Более плотными образованиями оказываются ядерная оболочка и ядрышко. Ядра Paramaecium caudatum имеют плотную консистенцию, но плотность ядра меньше, чем включений, и поэтому оно светится слабее.
20