Препарат № 17. Дезоксирибонуклеиновая кислота в ядрах. Кишечник аксолотля (рис. 16)
Данный препарат служит для ознакомления, с распределением дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) в различных клетках.
Участок тонкой кишки аксолотля фиксируют в смеси Ценкера, заливают в парафин и делают поперечные срезы толщиной 4-5 μ. Проводят реакцию Фельгена на ДНК (длительность гидролиза 4-5 мин). После этого докрашивают препарат слабым (0,1%-ным) раствором светлого зеленого. ДНК окрашивается в красно-фиолетовый цвет, все остальные элементы клетки - в зеленый.
На поперечном срезе через кишку необходимо разобрать различные ткани, составляющие стенку кишки. Наружный слой стенки образуют гладкие мышцы (снаружи продольные, в глубине кольцевые). Затем идет соединительная ткань и эпителий,
27
выстилающий просвет. Просвет кишки обыкновенно сжимается и имеет звездчатую форму.
С иммерсионным объективом следует рассмотреть ядра клеток различных тканей. Ядра эпителиальных клеток содержат
Рис. 16. Дезоксирибонуклеиновая кислота в ядрах различных клеток стенки .тонкой кишки аксолотля (увеличение - ок. 7, об. 40):
1 - ядра эпителия, 2-ядра клеток соединительной ткани, 3-ядро эритроцита, 4- ядра гладких мышечных клеток в продольном разрезе, 5- ядра гладких мышечных клеток в поперечном разрезе, 6-ядра клеток серозной оболочки
много красно-фиолетовых глыбок и зерен. Часть глыбок плотно прилегает к ядерной оболочке, часть лежит свободно, иногда соединяясь друг с другом посредством тонких нитей. В ядре заметно, кроме того, одно или два круглых тельца, окрашенных в зеленый цвет. Это ядрышки. Они не дают реакции Фельгена,
28
но хорошо окрашиваются светлым зеленым. Очень часто на зеленые ядрышки налипают красно-фиолетовые глыбки ДНК.
В соединительной ткани среди вытянутых клеток - фибробластов находятся кровяные клетки - эритроциты. У аксолотля эритроциты имеют ядра, очень густо заполненные ДНК. На препарате ядра эритроцитов сплошь окрашены в красно-фиолетовый цвет. Цитоплазма эритроцитов желто-зеленая. Для сравнения можно рассмотреть еще ядра мускульных клеток, описанные в препарате № 100.
Изучаемый препарат показывает, что ДНК в клетке имеется только в ядре. Цитоплазма и ядрышко ДНК не содержат. Кроме того, содержание ДНК в разных ядрах различно. Особенно богаты ДНК ядра эритроцитов аксолотля.
29